Ang sosa citrate buffer ay ginagamit para sa paghihiwalay ng RNA dahil binabawasan nito ang base hydrolysis ng mga strands ng RNA. Ginagawa nito ang isang mahalagang hakbang sa paglilinis ng mRNA sa panahon ng genomic research o para sa pag-aaral ng transcription.
Ang mga buffer na nakabatay sa sitentrasyon ay maaari ring makatulong sa pagtuklas ng mga antigens sa mga nakapirming mga paghahanda ng tisyu dahil sinira nila ang mga cross-link na nabuo sa pagitan ng mga antigens at ang fixation media.
Sa gabay sa ibaba, gumawa ng sosa citrate buffer ng pH 6. Ang mga tagubilin ay hindi lamang madaling ngunit mabilis na execute din. Ito ay dapat lamang magdadala sa iyo tungkol sa 10 minuto upang makumpleto ang mga hakbang na ito.
Dalawang Opsyon na Gumawa ng Buffer
Mayroong dalawang mga paraan upang gawin ang tungkol sa paggawa ng sosa sitrato buffer. Una, matukoy kung mayroon kang parehong citric acid at ang base ng conjugate, sodium citrate, upang gumana. Kung mayroon ka lamang citric acid, hindi ito problema. Maaari mo pa ring gawin ang buffer.
Sa kabilang banda, kung mayroon kang parehong acid at base, lumikha ng stock solusyon ng bawat isa. Paghaluin ang 21 gramo ng sitriko acid sa 1 litro ng dalisay na tubig, at 29.4 gramo ng sodium citrate sa 1 litro ng distilled water.
Kung mayroon ka lamang citric acid, ihalo ang 2.1 gramo sa ilalim lamang ng 1 litro ng dalisay na tubig at magpatuloy sa susunod na hakbang.
Paghahalo ng Citric Acid at Sodium Citrate Solutions
Ngayon na iyong ginawa ang iyong stock solusyon (kung mayroon kang parehong acid at isang base) o halo-halong iyong acid sa distilled water (kung hindi mo), maaari kang tumuon sa iyong mga solusyon.
Paghaluin ang 82 mililitro ng solusyon sa sitriko acid na may 18 mililiters ng sosa citrate solution.
Pagkatapos, gawin ang kabuuang dami ng pinaghalong hanggang sa ilalim lamang ng 1 litro na may dalisay na tubig. Mag-iwan ng sapat na dami upang pahintulutan ang pagdaragdag ng sosa hydroxide (NaOH) sa susunod na hakbang.
Pagsasaayos ng PH
Habang dahan-dahang pagpapakilos ang solusyon gamit ang isang magnetic stirrer, gamitin ang 1M sodium hydroxide upang ayusin ang pH ng pinaghalong sa 6.0. Pagkatapos nito, gawin ang huling dami ng solusyon hanggang sa 1 litro na may dalisay na tubig sa pamamagitan ng paggamit ng volumetric flask.
Ang Kailangan Ninyong Gumawa ng Buffer
Hindi lamang ito ay magdadala sa iyo ng masyadong mahaba upang gawin ang sosa sitrato buffer, hindi mo rin kailangan ng maraming mga materyales para dito alinman. Sa sitriko acid, 1M ng sodium hydroxide, distilled water, at calibrated pH probe, magkakaroon ka sa kalagitnaan doon. Ang paggamit ng sodium citrate ay opsyonal.
Ang paggawa ng buffer ay nangangailangan din ng isang 1 litro na nagtatapos na silindro, isang 1-litro na volumetric flask, at tatlong 1 litro na botelya ng media. Sa wakas, kakailanganin mo ng magnetic stir bar at isang magnetic stirrer.
Kung wala kang lahat ng mga materyales na ito, isaalang-alang ang paggamit ng lab sa iyong paaralan o site ng trabaho, kaya hindi mo kailangang bilhin ang mga ito sa iyong sarili. Maaari mo ring madaling bumili ng mga materyales na ito sa online o bisitahin ang isang espesyalidad na tindahan ng mga kalakal sa iyong lugar.