Paano Gumawa ng Phosphate Buffer

Ang mga buffer na ito ay maaaring gamitin para sa mga biological application sa malapit na neutral na PH

Ano ang nakakaapekto sa mga buffer ng phosphate? Una, dahil naglalaman ito ng tatlong acidic protons, ang phosphoric acid ay may maraming mga konstasyon sa paghihiwalay at maaaring magamit upang lumikha ng mga buffer para sa alinman sa tatlong kaukulang pH.

Ang tatlong halaga ng pKa para sa phosphoric acid (mula sa CRC Handbook of Chemistry and Physics) ay 2.16, 7.21 at 12.32. Monosodium phosphate at ang conjugate base nito, ang disodium phosphate ay kadalasang ginagamit upang makabuo ng mga buffer ng mga halaga ng pH sa paligid ng 7, para sa mga biological application, tulad ng ipinapakita dito.

Ang paggawa ng buffer na ito ay medyo mas mahirap kaysa sa paggawa ng TAE at TBE buffers. Gayunpaman, hindi napakahirap. Simple lamang. Ito ay dapat tumagal ng tungkol sa 10 minuto upang hagupit ang buffer na ito. Narito kung paano.

1. Magpasya sa Buffer Properties

Bago gumawa ng isang buffer, dapat mo munang malaman kung ano ang molarity na gusto mo ito, kung ano ang lakas ng tunog at kung ano ang nais na PH. Karamihan sa mga buffers ay pinakamahusay na gumagana sa concentrations sa pagitan ng 0.1 M at 10 M. Ang pH ay dapat na sa loob ng 1 pH yunit ng acid / conjugate base pKa. Para sa pagiging simple, ang pagkalkula ng sample na ito ay para sa 1 litro ng buffer.

2. Tukuyin ang Ratio ng Acid sa Base

Gamitin ang Henderson-Hasselbalch equation (sa ibaba) upang matukoy kung ano ang ratio ng acid sa base ay kinakailangan upang gumawa ng isang buffer ng nais na PH. Gamitin ang halaga ng pKa na pinakamalapit sa iyong ninanais na pH at ang ratio ay tumutukoy sa pares ng acid-base conjugate na tumutugma sa pKa na iyon.

HH Equation: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])

Para sa isang buffer ng pH 6.9, [Base] / [Acid] = 0.4898

Kapalit ng [Acid] at Solve para sa [Base]

Ang nais na molarity ng buffer ay ang kabuuan ng [Acid] + [Base].

Para sa 1 M buffer, [Base] + [Acid] = 1 at [Base] = 1 - [Acid]

Sa pamamagitan ng pagpapalit nito sa equation ratio, mula sa hakbang 2, makakakuha ka ng:

[Acid] = 0.6712 moles / L

Solve for [Acid]

Gamit ang equation: [Base] = 1 - [Acid], maaari mong kalkulahin na:

[Base] = 0.3288 moles / L

3. Paghaluin ang Acid and Conjugate Base

Pagkatapos mong gamitin ang Henderson-Hasselbalch equation upang makalkula kung ano ang ratio ng acid sa base ay kinakailangan para sa iyong buffer, maghanda lamang sa ilalim ng 1 litro ng solusyon gamit ang tamang halaga ng monosodium phosphate at disodium pospeyt.

4. Suriin ang pH

Gumamit ng pH probe upang kumpirmahin na ang tamang pH para sa buffer ay naabot. Ayusin bahagyang kung kinakailangan, gamit ang phosphoric acid o sodium hydroxide (NaOH).

5. Tama ang Dami

Kapag ang nais na pH ay naabot, dalhin ang dami ng buffer sa 1 litro. Pagkatapos ay palabnawin ang buffer ayon sa ninanais. Ang parehong buffer na ito ay maaaring makalason upang lumikha ng mga buffer ng 0.5 M, 0.1 M, 0.05 M o anumang bagay sa pagitan.

6. Mga Tip para sa Buffer

Tandaan na ang pKa ay hindi madaling sinusukat sa isang eksaktong halaga. Maaaring magamit ang iba't ibang mga halaga sa panitikan mula sa iba't ibang mga mapagkukunan.

7. Ano ang Kailangan Mo

Upang gawin ang buffer, kakailanganin mo ang tatlong mga sangkap, habang ang mga natitirang materyales ay kagamitan. Ang mga sangkap ay monosodium phosphate, disodium phosphate, at phosphoric acid o sodium hydroxide upang ayusin ang pH.

Kakailanganin mo rin ang isang pH meter at probe at naaangkop na labware. Kabilang dito ang isang volumetric flask, mga cylinders na nagtatapos, mga beakers at mga bar ng pagpapakain.

Sa wakas, kakailanganin mo ng isang mainit na hotplate.